L’insémination intrautérine dans l’éjaculation rétrograde. Importance du pH et de l’osmolarité sur la mobilité des spermatozoïdes

Basic and Clinical Andrology, May 2019

L’effet du pH et de l’osmolarité sur la mobilité des spermatozoïdes récupérés dans les urines après éjaculation rétrograde a été étudié. Le maximum de mobilité a été obtenu pour un pH compris entre 7 et 7,5 et une osmolarité comprise entre 300 et 400 m.osmoles Kg. La maîtrise de ces deux paramètres permet d’optimaliser la mobilité des spermatozoïdes et d’effectuer ainsi des inséminations intra-utérines au cours de cycles stimulés. Cinquante et un cycles d’inséminations ont été effectués sur 23 femmes. Onze grossesses ont été obtenues soit un taux de 21,5%/cycle.

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L’insémination intrautérine dans l’éjaculation rétrograde. Importance du pH et de l’osmolarité sur la mobilité des spermatozoïdes

L'ins mination i n t r a u t e r i n e d a n s l' jaculation r 6 t r o - g r a d e . I m p o r t a n c e d u p H e t d e l'osmolarit s u r l a m o b i l i t 6 d e s s p e r m a t o z o i d e s Kh~mais BEN RHOUMA 0 Elyas BEN MILED 0 Lassaad ZRIBI 0 0 Laboratoire de Biologie de la Reproduction Humaine. Maternitd Clinique Taoufik , El Menzah R E S U M E L ' e f f e t d u p H e t d e l ' o s m o l a r i t ~ s u r l a m o b i l i t ~ d e s s p e r m a t o z o i d e s r ~ c u p 6 r ~ s d a n s l e s u r i n e s a p r ~ s ~ j a c u l a t i o n r ~ t r o - g r a d e a ~ t ~ ~ t u d i ~ . L e m a x i m u m d e m o b i l i t 6 a ~t~ o b t e n u p o u r u n p H c o m - p r i s e n t r e 7 e t 7,5 e t u n e o s m o l a r i t ~ c o m p r i s e e n t r e 3 0 0 e t 4 0 0 m . o s m o l e s K g . L a m a i t r i s e d e c e s d e u x p a r a - m ~ t r e s p e r m e t d ' o p t i m a l i s e r la m o b i l i - t ~ d e s s p e r m a t o z o i d e s e t d ' e f f e c t u e r a i n s i d e s i n s e m i n a t i o n s i n t r a - u t ~ r i n e s a u c o u r s d e c y c l e s s t i m u l u s . C i n q u a n t e e t u n c y c l e s d ' i n s ~ m i n a t i o n s o n t ~ t 6 e f f e c t u ~ s s u r 2 3 f e m m e s . O n z e g r o s - s e s s e s o n t 6t~ o b t e n u e s s o i t u n t a u x d e 2 1 , 5 % / c y c l e . Mots cl~s : spermatozo~des, stimulation ovarienne> 6jaculation r~trograde, insemination intra-ut~rine. - I N T R O D U C T I O N Lors d'une 6jaculation r~trograde (ER) u n e p a r t i e ou la totatit~ du liquide spermatique p a s s e de l ' u r ~ t r e p o s t ~ r i e u r vers la vessie d'ou la p r e s e n c e de s p e r m a t o z o i d e s d a n s l'urine au cours de rorgasme. L'ER est due des pathologies diverses : l~sion du carrefour u r o g 6 n i t a l avec b~ance du col v~sical, pert u r b a t i o n des m6canismes neuromuscutaires c o n t r 5 1 a n t l ' 6 j a c u l a t i o n , ou i d i o p a t h i q u e (Pour r e v u e voir 8). La cons6quence principale de I'ER est la st~rilit~ masculine. Le r ~ t a b l i s s e m e n t d'une ~jaculation ant6grade n o r m a l e p e u t ~tre o b t e n u p a r u n e action pharmacologique [ 3, 10, 16 ], ou p a r u n trait e m e n t chirurgical [1, 14]. Nous r a p p o r t o n s ici u n t r a i t e m e n t de la st~rilit6 due ~ I'ER. L'urine ~tant u n milieu d~favorable pour la mobilit6 et la survie des spermatozoa'des (pH acide, hyperosmolarit~), il s'agit de la neutraliser et de r~duire au m a x i m u m le temps de contact e n t r e l'urine et le sperme. L'effet du p H et de l'osmolarit5 sur la mobilit6 des spermatozo~des a ~t6 6tudi6. L a s61ection des spermatozo~des mobiles a 6t~ faite p a r la technique de double lavage-centrifugation et m i g r a t i o n a s c e n d a n t e d a n s le m i l i e u B2 (INRA- B2, M e n e z o B i o m 6 r i e u x , F r a n c e ) [ 13 ]. A p r ~ s r ~ c u p S r a t i o n d e s s p e r m a t o zo~des, une ins6mination intra-ut6rine (IIU) est pratiqu~e au cours d'un cycle stimul6. M A T E R I E L ET M E T H O D E S Les p a t i e n t s ont ~t~ suivis d a n s le c a d r e d'un p r o g r a m m e de p r o c r e a t i o n m~dicalem e n t assist~e. I1 s'agit de 23 couples suivis p o u r s t 6 r i l i t 6 m a s c u l i n e d u e ~ I'ER. L a moyenne d'~ge est de 28,1 _+3,5 ans pour les f e m m e s e t de 3 4 , 0 _+ 2,7 a n s p o u r l e s hommes. Les diff6rentes pathologies mises en cause sont r~capitul6es dans le t a b l e a u 1. 1. P r e p a r a t i o n d u s p e r m e A v a n t de p r a t i q u e r les IIU, la qualit~ du s p e r m e du c o n j o i n t e s t a t t e s t ~ e p a r des tests de double lavage-centrifugation effectugs dans le mois prSc~dant la tentative. Au cours de ces tests, on ~tudie l'effet du p H et de l'osmolarit~ u r i n a i r e sur la mobilit~ des spermatozo~des. Le pourcentage de mobilit5 e s t o b t e n u p a r a p p r e c i a t i o n d i r e c t e s u r lame, et la morphologie est ~valu6e selon la Diagnostic classification de David et al [ 6 ]. L'alcalinisation et la dilution des urines se font par absorption d'une solution de bicarbonate de soude ~ 5% et d'une grande quantit6 d'eau, les 2 jours pr6c6dant le pr61~vement. Apr~s la masturbation pratiqu6e debout, ~ vessie pleine, ou apr~s l'acte sexuel, les urines sont r6cup6r6es. Le pH et l'osmolarit6 sont mesur6s et le pourcentage des spermatozoades p r 6 s e n t a n t u n e mobilit6 normalem e n t p r o g r e s s i v e e s t estim6. D a n s les minutes suivantes, l'urine est centrifug6e 250 g pendant 5 minutes. Une fois le surnageant 61imin6, le culot est repris dans 10 ml de milieu de Earles' (Biom6rieux, France) et centrifug6 de nouveau. 0,3 ml de milieu B2 sont alors ajout6s au culot de centrifugation pour la m i g r a t i o n des spermatozoides 37~ et sous gazage (5% CO2, 5% 02 et 90% N2), pendant 30 ~ 60 minutes. On demande aux marls de s'abstenir de tout acte sexuel pendant les 3 jours pr6c6dant le test ou la tentative d'ins6mination. 2. S t i m u l a t i o n o v a r i e n n e Les patientes re~oivent un t r a i t e m e n t de superovulation destin6 ~ stimuler la croissance folliculaire. Ce traitement comporte 100 mg/jour de citrate de clomif'ene (Clomid, Merrel Toraude) du 2~me au 6~mejour du cycle et 150 UI d'hMG (human Menopausal Gonadotropin, Humegon, Organon) tout les deux jours du 2~me au 10~mejour du cycle. L'obtention de plusieurs follicules de plus de 18 mm de diam~tre et des taux d'cestradiol p l a s m a t i q u e s a t t e i g n a n t 300 ~ 400 pg/ml/follicule en croissance, p e r m e t de Nbre de cycles d'insemination Nbre de grossesses (%/cycle) L'ins6mination intra-ut6rine est r~alis6e 34 + 2 heures apr~s rinjection de I'hCG [ 7 ] : 0,2 ml de la suspension des spermatozo~des sont charg6s dans un cath6ter de KremerDeLafontaine (Laboratoires CCD, France) attach6 ~ une seringue de 1 ml (Becton-Dickinson, New jersey). Le cath6ter est ensuite introduit par le col cervical et la totalit6 de la suspension est inject6e ~ l'int6rieur de l'ut6rus, la femme reste allong6e une demiheure. R E S U L T A T S La figure i repr6sente l'effet de la variation du pH sur la mobilit6 des spermatozoides. On observe u n m e i l l e u r p o u r c e n t a g e de mobilit6 pour des pH compris entre 7 et 7,5. Au del~ de ces deux valeurs la mobilit6 des gametes chute consid6rablement. De m~me pour l'osmolarit6 (Figure 2) le maximum de mobilit6 se s i t u e e n t r e 300 et 400 m.osmoles/Kg. Les c a r a c t 6 r i s t i q u e s des s p e r m a t o z o i d e s apr~s diffusion d a n s le milieu B2 sont pr6sent6es dans le tableau 2. La concentration moyenne obtenue est de (30,0 + 2,4) x 106 spermatozo~des/ml, Le p o u r c e n t a g e m o y e n des spermatozoa'des mobiles et de formes normales est respectivement de 50,1 _+1,5% et 48,2 _+0,9%. Au total, pour les 23 femmes, les ins6minations i n t r a - u t 6 r i n e s ont produit 11 gros,-I ff:l o Diagnostic s e s s e s s u r les 51 cycles soit u n t a u x de 21,5%/cycle. Six grossesses ont ~t~ obtenues la 1~re i n s e m i n a t i o n pour 23 couples, 3 grossesses ~ la 2~me ins6mination pour 17 couples et 2 grossesses ~ la 3~me insemination p o u r 14 couples. Deux g r o s s e s s e s se s o n t a r r ~ t ~ e s l ' u n e ~ 15~me s e m a i n e et l'autre ~ 21 ~me semaine. D I S C U S S I O N L a m ~ t h o d e qui c o n s i s t e ~ r e c u e i l l i r les s p e r m a t o z o ' d e s dans les urines apr~s u n e m a s t u r b a t i o n ou un rapport sexuel est utilisable quelle que soit la cause de I'ER. La pratique de la m a s t u r b a t i o n debout ~ vessie pleine, entraine une hyperpression v6sicale qui peut r~tablir plus ou moins l'orientation a n t ~ g r a d e de l ' ~ j a c u l a t i o n [ 5 ]. D ' a u t r e s techniques ont ~t~ propos~es telles que le lavage de la vessie avec u n milieu alcalin [ 17 ] et la miction intra-vaginale [ 15 ]. Dans le b u t de contr61er le m i e u x p o s s i b l e les valeurs du p H et de l'osmolarit~, nous avons d ~ t e r m i n ~ d a n s u n p r e m i e r t e m p s , l e s valeurs qui sont favorables ~ la mobilit~ des spermatozo~des dans les urines. Nous avons t r o u v ~ q u e le m a x i m u m de m o b i l i t ~ e s t compris entre u n p H de 7,2 et 7,5 c'est-~dire des valeurs conformes ~ celles du p H normal du liquide spermatique [ 9, 12 ]. Plusieurs t r a v a u x ont montr~ que l'influence nocive de l'urine sur la mobilit~ est pratiquement annul~e quand le p H e s t compris entre 7 et 8 [ 5, 11 ]. Au cours de ce travail, le contrSle de l'alcalinisation est beaucoup plus facile que celui de l'osmolarit~. Nos r~sultats montrent que les spermatozoi'des i m m o b i l e s ~ pH tr~s bas ou tr~s ~lev~, r e p r e n n e n t leurs mobilit~ lorsque le pH s ' a p p r o c h e de la n e u t r a l i t Y . En ce qui concerne l'osmolarit~, le maximum de mobilit~ e s t c o m p r i s e n t r e 300 et 400 m.osmol/Kg. Ces valeurs sont proches de la v a l e u r de la pression osmotique dans le l i q u i d e s ~ m i n a l qui e s t de 366  16 m.osmol/Kg [ 20 ]. D'autres auteurs rapportent des valeurs d'osmolarit~ id~ales entre 200 et 400 m.osmol/Kg [ 5, 12 ]. L'urine est tr~s s o u v e n t h y p e r o s m o l a i r e malgr~ les quantit~s d'eau ing~r~es. Ainsi, l'absorption de 300 ml d'eau provoque une chute import a n t e mais br~ve de l'osmolarit~ urinaire une heure apr~s l'ingestion [11]. La nocivit~ de l'urine hypertonique semble d~pendante du temps d'exposition des spermatozoides. P o u r des t e m p s courts, la mobilit~ des gametes est peu affect~e. Ceci semble en accord, avec les r~sultats de Chang et Thorsteinsson [ 4 ] qui ont montr~ qu'une urine hypertonique d~prime la mobilit~ des spermatozoa'des sans toutefois influencer leur fonction normale laquelle peut ~tre restaur~e d~s qu'ils sont introduits dans le tractus g~nital femelle. D'apr~s nos r~su[tats et vu l'importance de la mobilit~ des s p e r m a t o z o i d e s dans la f~condation, la quantit~ de bicarbonate de soude et d'eau qu'on donne aux maris, pouv a i t ~tre modul~e de faqon ~ c r i e r des conditions optimales de pH et d'osmolarit~ pour un maximum de mobilitY. Une fois ces deux param~tres maitris~s par cette m~thode non invasive, on peut effectuer des inseminations intra-ut~rines dans le cas des st~rilit~s dues ~ I'ER. Ainsi, au cours de ce travail, 11 grossesses ont ~t~ obtenues soit 21,5% par cycle d'ins~m i n a t i o n . Cette v a l e u r est sup~rieure celle rapport~e par Urry et al [ 19 ] qui ont obtenu un taux de 16% par cycle, mais elle est l~g~rement inf~rieure ~ celle trouv~e Dar Brassesco et al [2] qui observent 25% de g r o s s e s s e s p a r cycle chez 7 couples. Enfm, Van der Linden et al [ 21 ], darts une s~rie de femmes non stimul~es et dont rovulation est pr~dite par la mesure de la LH plasmatique, rapportent un taux tr~s ~lev6 de l'ordre de 44%/cycle. En conclusion, il apparait que la ma~trise des conditions de pH et d'osmolarit~ ainsi que l'utilisation de cycles stimulus, permettent d'avoir des r~sultats positifs quelle que soit la cause de I'ER. La technique utilis~e darts notre laboratoire, semble ~tre u n e bonne a l t e r n a t i v e pour les probl~mes de st~rilit6s dues ~ I'ER. R E F E R E N C E 1. A B R A H A M S JI, S O L I S H GI, B O O R J I A N P, WATERHOUSE RK : The surgical correction of retrograde ejaculation. J.Urol. 1975, 114 : 888-890. 2. BEASSESCO M, VISCASILLAS P, BUtLREL, CALAF J, RAJMI LO, SERRA JMP, FARGAS FM : Sperm recupetation and cervical insemination in retrograde ejaculation. Fertil.Steril. 1988, 49 : 923-925. 3. BROOKS ME, SIDI A_ : Tr,eatment of retrograde ejaculation using imipramine. Urology. 1981, 18 : 633. I n t r a u t e r i n e i n s e m i n a t i o n i n c a s e o f r e t r o g r a d e e j a c u l a t i o n . I m p o r t a n c e o f p H a n d o s m o l a r i t y o n s p e r m m o t i l i t y K h ~ m a i s B E N RHOUMA *,**, E l y a s BEN M~ILED *, L a s s a a d ZRIBI *** *Laboratoire de Biologie d e la R e p r o d u c tion Humaine. Maternitd C l i n i q u e Taoufik, E1 M e n z a h ; **Laboratoire d e Physiologie A n i m a l e , F a c u l t d des S c i e n c e s d e B i z e r t e ; *** S e r v i c e d'Urologie, H 6 p i t a l L a R a b t a , T u n i s - T u n i s i e T h e e f f e c t o f p H a n d o s m o l a r i t y o n m o t i l i t y o f h u m a n s p e r m a t o z o a i n r e t r o g r a d e e j a c u l a t i o n w a s s t u d i e d i n a f r e s h l y v o i d e d u r i n e s p e c i m e n . T h e m a x i m u m r a t e o f m o t i l i t y is o b t a i n e d w h e n t h e p H r a n g e d f r o m 7.0 t o 7.5 a n d o s m o l a r i t y f r o m 300 to 400 m.osmol/Kg. T h u s t h e c o n t r o l o f t h e s e t w o p a r a m e t e r s a l l o w e d u s to i m p r o v e s p e r m motil i t y a n d t o p e r f o r m i n t r a u t e r i n e i n s e . m i n a t i o n w i t h o v a r i a n h y p e r s t i m u l a tion. The d i f f e r e n t c a u s e s o f r e t r o g r a d e e j a c u l a t i o n i n t h i s s t u d y are d i a b e t e s , s u r g i c a l i n j u r y a n d i d i o p a t h i c . F i f t y o n e i n t r a u t e r i n e i n s e m i n a t i o n c y c l e s w e r e r e a l i z e d in t w e n t y - t h r e e p a t i e n t s , a n d e l e v e n p r e g n a n c i e s a r e o b t a i n e d (21.5 % p e r cycle). K e y w o r d s : s e m e n , o v a r i a n s t i m u l a t i o n , r e t r o g r a d e ejaculation, i n t r a u t e r i n e i n s e m i n a t i o n . 4. CHANG MC , T H O R S T E I N S S O N T : Effects of urine on motility and fertilizing capacity of rabit spermatozoa . Fertil.Steril . 1958 , 3 : 231 - 237 . 5. CRICH JP , JEQUIER AM : Infertility in men with retrograde ejaculation: the action of urine on sperm motility, and a simple method for achieving antegrade ejaculation . Fertil.Steril . 1978 , 30 : 572 - 575 . 6. DAVID G, BISSON JP , CZYGLIK F , JOUANNET P , GERNIGNON CL : Anomalies morphologiques du spermatozoide humain. I. Proposition pour un syst~me de classification J . Gyn. Obs. Biol. Reprod . (Paris). 1975 , 4 ( suppl 1) : 17 - 36 . 7. DODSON WC , HANEY A F. : Controlled ovarian hyperstimu|ation and intrauterine insemination for treatment of infertility . Fertil. Steril 1991 , 55 457 - 467 . 8. HERSHLAG A , SCHIFF SF , DECHERNEY AH Retrograde ejaculation . Human.Reprod . 1991 , ( 2 ) : 255 - 258 . 9. JOUANNET P : Comment interpreter un spermogramme . Rev.Prat. , 1979 , 32 : 2602 - 2604 . 10. LYNCH JH , MAXTED WC : Use of ephedrine in post-lymphadenectomy ejaculatory failure: a case report . J~Urol . 1983 , 129 : 379 . 11. MAHADEVAN M , LEETON JF , TROUNSON AO : Non invasive method of semen collection for successful artificial insemination in a case of retrograde e~aculation . Fertil.Steril . 1981 , 36 : 243 - 247 . 12. MAKLER A , DAVID R , BLUMENFELD Z , BETT E R OS : F a c t o r s a f f e c t i n g s p e r m m o t i l i t y . VII. Sperm viabil;ty as affected by change of pH and osmolarity of semen and urine specimens . Fertil. Steril . 1981 , 36 : 507 - 511 . 13. MENEZO Y : Milieu synth~thique pour la survie et la maturation des gametes et pour la culture de l'ceuf f~cond ~. C.R. Acad. Sc . D. 1976 , 282 : 1967 - 1970 . 14. MIDDLETON RG , URRY RL : The young-Dees operation for the correction of retro-,rade ejaculation . J.Urol . 1986 , 136 : 1208 - 1209 . 15. SCHRAM J D : Retrograde ejaculation : a new approach to therapy . Fertil.Steril . 1976 , 27 : 1216 - 1218 . 16. S H U T T E B , M E D E N W A L D T B : T r e a t m e n t of retrograde ejaculation in paraplegia . Andrologia . 1980 , 12 : 389 - 390 . 17. SUOMINEN JJO , KILKKU PP, TAINA EJ , PUNTALA PV : Successful treatment of infertil;ty due to retrograde ejaculation by instillation of serumcontaining medium into the bladder . A case report. Int. J. Androl . 1991 , 14 : 87 - 90 . 18. TESTART J , AMIEL ML : Contribution of preovulatory-phase small follicles to the ovarian response in stimulated cycles . Human.Reprod . 1991 , 6 ( 6 ) : 823 - 827 . 19. URRY R , M I D D L E T O N RG , MCGAVIN S : A simple and effective technique for increasing pregnancy rates in couples with retrograde ejaculation . Fertil. Steril . 1986 , 46 : 1124 - 1127 . 20. VALAZQUEZ A , P E D R O N N , DELGADO NM , ROSADO A : Osmolarity and conductance of normal and abnormal human seminal plasma . Int. J. Fertil . 1977 , 22 : 92 . 21. VAN DER LINDEN PJQ , NAN PM , TE VELDE ER , VAN KOOY RJ : Retrograde ejaculation: Successful treatment with artificial insemination . Obs.


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Khémais Ben Rhouma, Elyas Ben Miled, Lassaad Zribi. L’insémination intrautérine dans l’éjaculation rétrograde. Importance du pH et de l’osmolarité sur la mobilité des spermatozoïdes, Basic and Clinical Andrology, 62, DOI: 10.1007/BF03034621