Proteic electrophoretic profile of chitralada tilapia nilotic (Oreochromis niloticus), exposed to hypoxia chronic stress

ZOOTECNIA E TECNOLOGIA E INSPEÇÃO DE PRODUTOS DE ORIGEM ANIMAL   Perfil proteico de tilápia nilótica chitralada (Oreochromis niloticus), submetida  ao estresse crônico por hipóxia   Proteic electrophoretic profile of chitralada tilapia nilotic (Oreochromis niloticus), exposed  to hypoxia chronic stress     D.C. Melo; D.A.A. Oliveira; M.M. Melo; D.V. Júnior; E.A. Teixeira; S.R. Guimarães Escola de Veterinária - UFMG Caixa Postal 567 31123-970 – Belo Horizonte, MG     RESUMO Avaliou-se a variação da resposta secundária ao estresse causado por hipóxia durante 18 dias, em sistema de recirculação, em uma linhagem de tilápia nilótica (Oreochromis niloticus), chitralada, refletida no perfil proteico eletroforético do peixe e avaliou-se a diferença entre sexos para essa resposta. Foram utilizados 126 peixes, sendo 60 machos e 66 fêmeas, ambos com média de peso de 800g. O estresse crônico por hipóxia alterou (P<0,05) os valores médios relativos de albumina, α+β-globulinas e de γ-globulina, provocou alteração (P<0,05) nos níveis de proteína total relativo ao aumento no grupo dos machos, diminuição significativa dos valores médios absolutos de albumina devido à diminuição nas fêmeas e à diminuição de γ-globulina nos machos. As variantes proteicas, albumina e γ-globulina tiveram influência do sexo. Palavras-chave: tilápia, perfil eletroforético, estresse, hipóxia ABSTRACT This study evaluated the secundary response variation to hypoxia stress in a strain of chitralada nilotic tilapia (Oreochromis niloticus) during 18 days, in a recirculation system. The effects were measured by the proteic electrophoretic profile and the difference between the genders. One hundred twenty-six fish were used, 60 males and 66 females, both averaging 800g. The chronic hypoxia stress altered (P<0.05) the relative values of albumin, α+β-globulins, and γ-globulin; modified (P<0.05) the levels of total protein due to an increase in the male group; significantly decreased of the absolute mean values of albumin due to a decrease in the female group; and decreased the g-globulin values in males. The proteic profile, albumin, and γ-globulin were influenced by gender. Keywords: tilapia, electrophoresis profile, stress, hypoxia     INTRODUÇÃO As proteínas, compostos indispensáveis à vida, representam a base da estrutura de células, tecidos e órgãos. Funcionam como catalisadores enzimáticos nas reações bioquímicas, carreadores de muitos constituintes do plasma e na defesa do organismo como anticorpos. Na área de patologia de peixes, ocorrem muitas vezes dificuldades de se estabelecer um diagnóstico rápido e de baixo custo aos produtores. O perfil proteico eletroforético não fornece informações específicas, mas é útil no diagnóstico quando seus valores são analisados e associados ao quadro clínico, sendo importantes para o diagnóstico e o prognóstico de algumas enfermidades (Kaneko et al., 1997). Os dois principais tipos de proteínas do plasma são albumina e globulinas. A albumina é uma lipoproteína de alta densidade, e sua síntese é influenciada pela nutrição, balanço hormonal, estado geral do fígado e estresse (Hasegawa et al., 2002). Suas funções estão relacionadas com o transporte de substâncias e com a regulação e a manutenção da pressão coloidosmótica sanguínea (Leite, 1995; Kaneko et al., 1997; Thrall, 2007). As globulinas abrangem proteínas que atuam no sistema imune, fatores de coagulação, enzimas e proteínas transportadoras. Geralmente, são classificadas em alfa, beta e gamaglobulinas (também denominadas imunoglobulinas), em função de sua mobilidade eletroforética (Gershwin, 1989; Kaneko et al., 1997; Godoy et al., 2006; Thrall, 2007). Ao contrário dos mamíferos e das aves que apresentam cinco tipos de imunoglobulinas (IgA, IgE, IgD, IgG e IgM), os peixes apresentam apenas um tipo, a IgM. Em sistemas intensivos de criação de peixes, a ocorrência de situações estressantes é inevitável. Durante o período de criação, os animais são submetidos a inúmeros manejos e variações ambientais. As consequências são, geralmente, redução do crescimento e do ganho de peso, do desempenho reprodutivo e da resistência a patógenos. O somatório dessas mudanças é comumente referido como resposta ao estresse (Barton e Iwana, 1991). Vários estudos têm mostrado que o estresse exerce efeito depressivo sobre várias respostas imunológicas em peixes, como aumento nas proteínas totais séricas (Milligam e Wood, 1982; McDonald e Milligan, 1992) e diminuição na produção de anticorpos (IgM) e no número de células produtoras de anticorpos (Carlson et al., 1993). Muitos estudos têm sido realizados com determinação das proteínas e seu valor no diagnóstico e no prognóstico das doenças em mamíferos e aves (Canavessi et al., 2000; Hasegawa et al., 2002; Godoy et al., 2006). Os poucos trabalhos existentes sobre perfil proteico eletroforético de peixes são referentes à administração de imunoestimulantes ou comparação entre espécies (Tinman et al., 2000; Palti et al., 2000). Porém, não existem estudos sobre a influência do estresse por hipóxia no perfil proteico eletroforético de tilápias. Portanto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar o perfil proteico eletroforético de tilápias da linhagem chitralada, submetidas ao estresse por hipóxia.   MATERIAL E MÉTODOS Foram utilizados 126 peixes do gênero Oreochromis, linhagem chitralada, sendo 60 machos e 66 fêmeas, ambos com média de peso de 800g, oriundos da Fazenda Geneforte, localizada no município de Pedro Leopoldo, MG. Cada animal foi anestesiado com quinaldina1 (0,5mL/10L) e identificado por um piercing numerado no opérculo. Os peixes, transportados para o Laboratório de Aquacultura (Laqua) da Escola de Veterinária da UFMG e mantidos em tanques de 0,4m3 em sistema de recirculação com uma troca de água por hora (400L/h), durante duas semanas para aclimatação, receberam 1% do peso vivo de ração comercial, por dia para manutenção do peso. Após o período de aclimatação, fêmeas e machos foram separados - 10 e 11 animais por tanque, respectivamente, de modo que essa estocagem não provocasse estresse devido à densidade -, pesados e divididos por sorteio em: três tanques de tilápias machos submetidas ao estresse e outros três sem estresse (controle); três tanques de tilápias fêmeas submetidas ao estresse e outros três sem estresse (controle). O estresse aplicado ao experimento foi por redução da taxa de oxigênio dissolvido na água para aproximadamente 1,5mg/L durante 18 dias. Para isso, os fluxos dos tanques contendo os animais submetidos ao estresse foram ajustados para 0,415L de água por minuto para cada quilo de peixe, e os registros de ar foram deixados ligeiramente abertos. Já os tanques contendo os animais-controle foram ajustados para 1,25L de água por minuto para cada quilo de peixe, e os registros de ar foram deixados abertos totalmente (Tab. 1). O monitoramento do oxigênio e a temperatura da água nos tanques eram fe (...truncated)