Detección de un caso de síndrome de Williams-Beuren por MLPA

ISSN 0025-7680 47 DETECCIÓN DEL SÍNDROME DE WILLIAMS-BEUREN POR MLPA CASUÍSTICA MEDICINA (Buenos Aires) 2013; 73: 47-50 DETECCIÓN DE UN CASO DE SÍNDROME DE WILLIAMS-BEUREN POR MLPA SERGIO LAURITO1, TERESITA BRANHAM1, GUSTAVO HERRERO2, SILVANA MARSA3, FERNANDA GARRO2, MARÍA ROQUÉ1 1 Laboratorio de Alteraciones Genéticas y Epigenéticas en Patologías Humanas IHEM-CCT-CONICET-Mendoza, Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Cuyo, Mendoza; 2 Pediátrica San Luis Centro Médico Privado, San Luis; 3GENES, San Luis Resumen El síndrome de Williams-Beuren (WBS) es un trastorno del desarrollo neurológico que incluye diferentes manifestaciones clínicas como estenosis aórtica supravalvular, lesiones cerebrovasculares, retraso en el crecimiento, rasgos faciales “élficos” y retraso mental. Es causado por una microdeleción heterocigótica de genes contiguos en la banda cromosómica 7q11.23, generando un cambio en el número de copias (CNV) de esta región crítica. Los pacientes presentan una amplia manifestación clínica y variada expresión fenotípica. La confirmación de la sospecha clínica es esencial para el seguimiento clínico del paciente y el asesoramiento genético de la familia. La técnica estándar para la detección de WBS es la hibridización fluorescente in situ. En los últimos años la metodología MLPA (Multiplex Ligation dependent Probe Amplification) ha sido incorporada a los laboratorios diagnósticos para la detección de CNV relacionados con distintas enfermedades, incluyendo WBS. El objetivo de este trabajo fue confirmar el diagnóstico clínico de WBS en un niño, utilizando la técnica de MLPA. Los ensayos por MLPA permitieron detectar la deleción de los genes CYLN2, FZD9, STX1A, ELN, LIMK1y RFC2. En regiones geográficas donde la determinación por FISH (Fluorescence In Situ Hybridization) no está disponible para esta enfermedad, la metodología MLPA ha permitido confirmar el diagnóstico clínico y detectar los genes involucrados en la alteración. Hasta nuestro conocimiento no hay otros casos publicados sobre síndrome de WB detectado por la técnica MLPA en la Argentina. Palabras clave: síndrome de Williams Beuren, MLPA Detection of a Williams Beuren syndrome case by MLPA. Williams-Beuren syndrome (WBS) is a rare developmental disorder characterized by distinctive facial, neurobehavioral, and cardiovascular features. WBS is caused by a heterozygous contiguous gene microdeletion of the WBS crítical region on chromosome 7q11.23. Confirmation of clinical suspicion is essential for clinical monitoring of the patient and genetic counseling of the family. Fluorescence in situ hybridization (FISH) is considered the gold standard technique for detecting WBS. Multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) has been introduced into DNA diagnostic laboratories for the detection of copy number variations in several diseases including WBS. The objective of this study was to confirm, by MLPA, the clinical diagnosis of WBS in a pediatric patient. This technique allowed to detect the deletion of CYLN2, FZD9, STX1A, ELN, LIMK1 and RFC2 genes. In geographic regions were the detection by FISH is not available for this disease, the MLPA methodology allowed to confirm the clinic diagnostic of WBS. To our knowledge this is the first report demonstrating the confirmation of WBS by MLPA in Argentina. Abstract Key words: Williams Beuren syndrome, MLPA El síndrome de Williams-Beuren (WBS; OMIM 194050) es un trastorno del desarrollo neurológico que incluye diferentes manifestaciones clínicas como estenosis aórtica supravalvular, lesiones cerebrovasculares, retraso en el crecimiento, rasgos faciales “élficos” y retraso mental. Recibido: 16-IV-2012 Aceptado: 24-VIII-2012 Dirección postal: Dra. María Roqué, Laboratorio de Alteraciones Genéticas y Epigenéticas en Patologías Humanas, IHEM-CCTCONICET, Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Cuyo, Parque General San Martín, 5500 Mendoza, Argentina Telefono (54-261) 4494117 e-mail: Además, en esta enfermedad se han comunicado trastornos en el metabolismo de la vitamina D e hipercalcemia1. Los pacientes con WBS presentan frecuentemente hiperacusia, personalidad amigable y la aparición precoz de arrugas en la piel. La frecuencia varía según los informes entre 1:7 000 y 1:20 000 nacimientos vivos1, sin presentar diferencias entre razas ni sexos. El síndrome WB es causado en el 90-95% de los pacientes, por una microdeleción heterocigótica de genes contiguos en la banda cromosómica 7q11.23, llamada región crítica de WBS. Esta región abarca de 1.5 a 1.8 Mb y contiene al menos 25 genes (Tabla 1). Flanqueando la región crítica se encuentran 2 regiones 48 MEDICINA - Volumen 73 - Nº 1, 2013 repetitivas (LCRs) con homología cercana al 97%. Son estas regiones LCR las que pueden provocar una recombinación no-homóloga durante la meiosis, generando como consecuencia un cambio en el número de copias (CNV) (deleción o duplicación) de la región crítica en los pacientes WBS. La deleción de esta región es la alteración más frecuentemente relacionada con WBS. Si bien el síndrome cuenta con rasgos específicos, los pacientes presentan una amplia manifestación clínica y expresión fenotípica variada. La confirmación de la sospecha clínica es esencial para el seguimiento clínico del paciente y el asesoramiento genético de la familia. Un diagnóstico certero y precoz es fundamental para evitar pasos innecesarios y planificar las medidas óptimas de tratamiento. Desde que se conoció la causa genética de WBS en 1993, el diagnóstico es confirmado por la técnica de FISH2 (Fluorescence In Situ Hybridization) mediante una sonda que detecta la deleción del gen de la elastina (ELN) y/o TABLA 1.– Genes de la región crítica de WBS, 7q11.23 Gen Descripción (en inglés) ABHD11 BAZ1B BCL7B CLDN4 CYLN2** CPETR1 CPETR2 CPETR2 DNAJC30 E1F4H ELN* FKBP6 FZD9* GTF2I GTF2IRD1 GTF2IRD2B LAT2 LIMK1* MLXIPL NCF1 NSUN5 RFC2* STX1A* TBL2 VPS37D abhydrolase domain containing 11 bromodomain adjacent to zinc finger domain, 1B B cell lymphoma 7 gene related claudin 4 CAP-GLY domain containing linker protein 2 Clostridium perfringens enterotoxin receptor 1 Clostridium perfringens enterotoxin receptor 2 Clostridium perfringens enterotoxin receptor 2 DnaJ (Hsp40) homolog, subfamily C, member 30 Eukaryotic translation intitiator factor 4H Elastin FK506 binding protein 6 frizzled family receptor 9 general transcription factor IIi GTF2I repeat domain containing 1 GTF2I repeat domain containing 2B linker for activation of T cells family, member 2 LIM domain kinase 1 MLX interacting protein-like neutrophil cytosolic factor 1 NOP2/Sun domain family, member 5 Replication factor C, subunit 2 Sintaxin 1A transducin (beta)-like 2 vacuolar protein sorting 37 homolog D (S. cerevisiae) *Indica los genes detectados por las sondas de MLPA (kit P064); **indica que dos sondas reconocen el mismo gen por análisis de marcadores microsatelitales ubicados dentro de la región crítica de WBS. En (...truncated)